Лаборатория атеротромбоза

Научные результаты:

• Разработан оригинальный метод выделения внеклеточных везикул из биологических и культуральных сред на основе конъюгации с магнитными наночастицами и магнитной сепарации для их индивидуальной оценки с помощью многоцветовой проточной цитометрии.
• Впервые определено с помощью индивидуального анализа содержание различных типов экстраклеточных везикул в плазме пациентов с острым коронарным синдромом и у здоровых добровольцев.
• Продемонстрировано уменьшение количества экстраклеточных везикул тромбоцитарного происхождения, ко-экспрессирующих СD31, CD63 и CD41 у пациентов с острым коронарным синдромом на фоне антиагрегантной терапии.
• Исследовано изменение состояния эндотелия у пациентов с острым инфарктом миокарда и продемонстрировано положительное влияние отдаленного ишемического прекондиционирования на преодоление эндотелиальной дисфункции.
• Продемонстрирована корреляция состава эндотелиальных экстраклеточных везикул с функцией эндотелия.
• Оптимизирован оригинальный способ выделения иммунных клеток из атеросклеротических бляшек с сохранением их фенотипической индивидуальности для дальнейшего анализа клеточного состава бляшки с помощью многоцветной проточной цитометрии.
• Выявлено у пациентов с атеросклерозом преобладание активированных эффекторных CD4+ и CD8+ Т-лимфоцитов в атеросклеротических бляшках по сравнению с кровью, что может быть одной из причин дестабилизации атеросклеротических бляшек.
• Исследовано с целью поиска причины активации Т-лимфоцитов в атеросклеротических бляшках содержание вирусов герпеса человека (1–8 типов) в крови, плазме, атеросклеротических бляшках и интактных участках сосудистой стенки. Хотя бы один тип вируса герпеса человека обнаружен более чем в 93% образцов.
• Выявлено по повышению копийности ДНК ЦМВ в плазме крови значительное преобладание активной цитомегаловирусной (ЦМВ) инфекции у пациентов с острым коронарным синдромом по сравнению со здоровыми добровольцами. Установлена положительная корреляционная связь между количеством копий ЦМВ.
• Впервые показано, что наличие вирусов герпеса в плазме крови (как признак активности вируса у пациентов) коррелирует с количеством лимфоцитов различной степени дифференцировки и маркером воспаления вч-СРБ у пациентов с распространенным атеросклерозом. Таким образом доказано, что цитомегаловирусная активация приводит к запуску активного иммунного ответа, который, в свою очередь, может приводить к росту и дестабилизации атеросклеротических бляшек, повышая риск развития острого ишемического события.
• Разработана трехмерная модель и методика культивирования эксплантов атеросклеротических бляшек, и определено изменение их клеточного состава в процессе культивирования. Изучено содержание всех типов герпес-вирусов в бляшках и цитокинового профиля в культуральной среде.

Внедрение результатов исследования:

• Патент РФ № 2583940 «Способ определения состава индивидуальных внеклеточных везикул в крови человека». Дата приоритета: 17.12.2014. Авторы: Ж. Ш. Гривель, Н. Б. Рязанкина, М. С. Вагида, А. М. Лебедева, О. И. Иванова, Л. Б. Марголис, А. Аракелян, Е. Ю. Васильева.
• Патент РФ № 2616243 «Способ определения клеточного состава атеросклеротических бляшек». Дата приоритета: 10.12.2015. Авторы: О. И. Иванова, А. М. Лебедева.
• Подана заявка на патентование способа выделения вирусных нуклеиновых кислот из различных фракций экстраклеточных везикул. Заявка № 218100803. Дата приоритета: 11.01.18. Авторы: А. М. Лебедева, Е. В. Марюхнич, О. И. Иванова, М. С. Вагида, Е. Ю. Васильева.
• Разработан набор праймеров и проб для оценки степени активации вирусов герпеса человека (1–8 типов) по количеству копий ДНК, определенного методом мультиплексного ПЦР.

Организационные и инфраструктурные преобразования:

Использовано оборудование Лаборатории для проведения клинических анализов совместно с Городской клинической больницей имени И. В. Давыдовского и в образовательном процессе на кафедре кардиологии Московского государственного медико-стоматологического университета имени А. И. Евдокимова.

Образование и переподготовка кадров:

• Защиты: 5 кандидатских диссертаций.
• Разработаны и внедрены в учебный план 5 новых рабочих программ переподготовки для врачей различных специальностей и биологов: «Мембранные везикулы в биологии атеросклероза», «Иммунные механизмы в патогенезе атеросклероза», «Экстраклеточные везикулы в норме и патологии», «Биология атеросклероза», «Вирусы и внеклеточные везикулы», «Макрофаги в патогенезе атеросклероза».
• Разработаны лекционные и практические занятия по программе «Неотложная кардиология».
• Регулярно проводятся лекции, семинары и конференции с участием ученых мирового уровня. К выполнению работ привлечены квалифицированные молодые ученые.

Сотрудничество:

• Отдел межклеточных взаимодействий Национального института детского здоровья и развития человека имени Ю. К. Шрайвер Национальных институтов здоровья США: совместные исследования, стажировки сотрудников, организация конференций, семинаров.
• Case Western University (США), Национальный исследовательский университет «Высшая школа экономики» (Россия), Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии имени почетного академика Н. Ф. Гамалеи Министерства здравоохранения Российской Федерации, ЗАО «МД проект 2000» (Россия), ООО «Тартис-старение» (Россия): совместные исследования.